大腸桿菌顯色培養基主要用于大腸桿菌的快速分離和鑒定。培養基為選擇性培養基,同時檢測水和食品中的大腸桿菌和大腸菌群,它可使受損的大腸菌群快速恢復。除了常規營養外,培養基還含有月桂基硫酸鈉、L-色氨酸和顯色混合劑。顯色混合劑同時檢測β半乳糖苷酶和葡萄糖醛酸酶。L-色氨酸用于吲哚反應。大腸菌群為β半乳糖苷酶(+),大腸桿菌為β半乳糖苷酶(+)和葡萄糖醛酸酶(+),大腸桿菌O157為葡萄糖醛酸酶(-)。
大腸桿菌顯色培養基實驗原理:白胨和酵母膏粉提供氮源和微量元素,氯化鈉可維持均衡的滲透壓,十二烷基硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌,瓊脂是培養基凝固劑;顯色底物與大腸桿菌的ß-半乳葡糖苷酶發生特異反應,水解底物,釋放顯色基團,使大腸桿菌菌落顯示綠色。大腸桿菌分解蛋白胨中的色氨酸,生成靛基質,與靛基質試劑作用,在大腸桿菌菌落周圍形成玫瑰吲哚而呈紅色。大腸桿菌典型菌落為藍綠色,大腸菌群為無色菌落,其它細菌為無色或黃色菌。
需要注意的是:使用過的大腸桿菌顯色培養基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關規定丟棄。制備好的平板應立即使用,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8℃,注意避光保存。干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。