一、試驗原理:
本產品是青島海博生物技術有限公司改良的培養基,主要用于食品、水、牛奶、冰激凌、肉制品中大腸桿菌的顯色培養及快速檢測。
特殊營養物質提供微生物生長所需的碳氮源和微量元素,維持均衡的滲透壓,并提供針對革蘭氏陽性細菌的選擇性,特別是桿菌和糞鏈球菌;顯色劑是由發色團和微生物部分可代謝物質組成,在特異性酶靶定作用下,游離出產色因子用于合成細胞使菌落顯示顏色。在TBX培養基上,大腸桿菌菌落顯藍綠色,其它菌顯黃色或無色。
二、培養基配方(g/L)
三、試驗方法:
1.稱取本品36.6 g,加入1000 mL蒸餾水(可根據培養需要擴大或縮小產品用量),加熱溶解并不停攪拌,煮沸不超過1 min,分裝三角瓶,121 ℃,15 min滅菌,備用;
2.質控菌液按國標、SN標準、FDA標準或其它方法制備而成;
3.取1ml樣品液加入無菌平皿中,傾入冷卻至45-50 ℃的培養基混勻;或待培養基冷卻至45-50 ℃時傾倒平板,待凝固后開蓋吹15-30 min,取100 μL適當稀釋度的樣品液涂布于培養基上,36±1 ℃倒置培養18-24 h;
4.選用有30-200個菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍綠色,其它細菌為無色或黃色菌落。
四、試驗結果判斷:
1.外觀
此干燥培養基粉末均勻,呈乳白色,煮沸滅菌后制備好的固體平板為無色透明狀。
2.生物學實驗
接種以下質控菌株,放入培養箱中,于36±1 ℃倒置培養18-24 h,觀察試驗結果。
表2 TBX培養基不同菌株質量控制結果
圖1 TBX培養基微生物質控結果
a:大腸埃希氏菌ATCC 25922;b:大腸埃希氏菌CMCC 44102;c:沙門氏菌ATCC 14028;
d:產氣腸桿菌CMCC 45108;e:陰溝腸桿菌ATCC 23355;f:金黃色葡萄球菌ATCC 25923